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复方黄连素片测定方法

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测定方法名称:复方黄连素片中盐酸小檗碱的高效液相色谱法

应用范围:本方法适用于对中成药复方黄连素片中盐酸小檗碱含量的定量分析。

方法原理:取供试品,将其细粉与沸水混合,加入盐酸处理后,过滤并用流动相稀释。样品通过高效液相色谱仪进行色谱分离,利用紫外吸收检测器在265nm波长下测定盐酸小檗碱的峰面积,从而计算出其含量。

所需试剂:
1. 乙腈
2. 稀盐酸(取234mL盐酸,用水稀释至1000mL)
3. 0.033mol/L磷酸二氢钾溶液

仪器设备:
1. 高效液相色谱仪
2. 色谱柱(十八烷基硅烷键合硅胶填充,理论塔板数需大于3000)
3. 紫外吸收检测器

色谱条件:
- 流动相:乙腈 0.033mol/L磷酸二氢钾溶液,比例为40:60
- 检测波长:265nm
- 柱温:室温

试样制备步骤:
1. 称取并研细供试品,取20片除去糖衣,精确称重,取总量的1/20作为供试品。
2. 对照品溶液:称取干燥的盐酸小檗碱,溶解后加稀盐酸,稀释至每1mL含0.008mg盐酸小檗碱。
3. 供试品溶液:与对照品溶液制备过程类似,取上清液并用流动相稀释。

操作步骤:分别取对照品和供试品溶液10mL,注入高效液相色谱仪,在265nm波长测定盐酸小檗碱峰面积,计算含量。

参考文献:《中华人民共和国药典》(2005年版,一部),化学工业出版社,p534。

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