PCR实验室怎样建立pcr实验室
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发布时间：2024-10-18 05:51
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建立PCR实验室的关键步骤包括创建样品准备区、前PCR区、确保试剂操作的无污染、在前PCR区建立PCR混合物，以及实施有效的污染控制。
样品准备区专门用于样品的准备。在制备和操作用于核酸提取的试剂时，应采取预防措施，避免与PCR产物或DNA克隆接触，并确保用于处理样品的工具不会污染PCR活动。
前PCR区用于准备各种反应，需保持清洁，避免来自克隆和样品准备的污染。该区域应备有正压活塞式移液管等专门用于前PCR的设备。
PCR实验室试剂的操作需确保所有溶液无核酸和（或）核酸酶污染，使用高质量水，并建议在试剂中添加抗微生物剂。所有试剂应以大体积配制，分装成仅够一次使用的量进行贮存，并使用一次性灭菌的瓶子和管子。
在前PCR区建立PCR混合物时，可以预先配制并保存主混合物溶液以提高效率。此外，应保存阴性、弱阳性和强阳性对照样品，以分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。
污染控制方法包括使用UNG消除PCR产物引起的污染，以及使用紫外线降低污染程度。后PCR区用于分析样品并解释数据，使用的试剂、耗材和仪器应专门用于此目的，以避免前PCR活动的污染。
