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生物工程生产胰岛素的步骤。想解决目的基因如何获取?

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1,目的基因的获取:通过各种手段(基因文库,化学合成,PCR技术等)获取胰岛素基因
2,基因表达载体的构建:一般采用质粒,用同一种*酶切割质粒和切取目的基因(胰岛素基因)使产生相同的粘性末端,将切取的胰岛素基因片段插到质粒的切口处,再用DNA连接酶使质粒和胰岛素基因结合成重组质粒
3,将重组质粒导入受体细胞(如大肠杆菌,用感受态细胞法即Ca+处理)
4,检测与鉴定目的基因获得途径:
1*性内切酶酶切法
2利用PCR技术直接扩增目的基因
3目的基因的化学合成
4通过构建基因组文库或CDNA文库分离目的基因
5反向转录法分离目的基因
希望对你有帮助。。。

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