6孔和24孔细胞培养板接种和换液问题
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发布时间：2024-09-09 22:45
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时间：2天前
细胞铺板技术是细胞实验的基础，看似简单，实则需要掌握。常见的问题之一是细胞分布不均匀，表现为中间密或稀疏。
问题1：细胞传代正常，但放入六孔板后，部分孔中细胞长得不好，甚至呈现破碎状态。可能原因是换液时细胞温度过低，建议提前将培养基温育至接近室温，同时观察细胞状态和血清浓度，必要时可在37度水浴锅中温育或更换其他培养板。
问题2：六孔板接种细胞后，24小时更换培养基，部分细胞在更换前状态良好，但更换后出现一半细胞近乎死亡，一半细胞正常的情况。可能与培养板放置不水平、培养液过期、板子问题或操作时风机影响导致细胞失水有关。建议检查并调整，或更换培养板尝试。
问题3：24孔板接种后，每孔中间部分长不满，边缘长势良好，中间出现大量死细胞。可能原因是培养液加量不足，细胞处于液体张力的最低点，导致营养不足和干涸。同时，检查培养箱底部水位，确保湿度足够，避免液体蒸发导致浓度改变和渗透压过高。
个人经验认为，24孔板小，细胞分布不均匀是常见现象，可能与接种过程中的物理因素有关。操作时应避免暴力操作，确保细胞均匀分布。换液时应避免吸干培养基，以免细胞干涸死亡。同时，注意细胞的特性和生长状态，调整接种密度，有助于实现细胞分布的均匀。
